农作物种子纯度鉴定方法综述2

来源：种子与种苗　类别：技术文章　更新时间：2008-05-12　阅读次

2物理化学鉴定

通过物理化学方法是通过种子在某些特殊的化学药剂中产生特定的反应，测定种子的生理生化指标以鉴定品种纯度。如荧光扫描分析法、苯酚染色法、愈创木酚法等。物理鉴定法，可根据不同品种种子和幼苗含有荧光物质的差异进行鉴定。如利用紫外光处理燕麦种子可产生荧光，根据荧光的有无或强弱可区分不同品种�；Ъǚǹ筛莶煌分制た堑某煞趾突镏实牟钜�，以及对不同化学试剂反应显色的差异来鉴定品种。该方法快速、简便，但因要求被鉴定的种子必须具有物理化学的特异反应，其应用范围也受到很大的限制，目前应用较少。

3蛋白质电泳鉴定技术

不同作物品种基因型不同，基因的直接表达产物——蛋白质在种类、数量、结构等方面亦不同。电泳法是根据蛋白质数量、大小和结构的差异来揭示基因的差异，即由生化表现型反映基因型的生化标记方法，具有快速、准确性高、重复性好的优点。利用电泳技术对备检品种的种子或幼苗的蛋白质进行分离、染色，根据蛋白质电泳谱带的差异，并与品种的标准谱带相比较，从而鉴定品种的真实性和种子纯度。电泳鉴定方法中以同工酶电泳法和种子蛋白电泳法在品种鉴定和种子纯度分析研究方面己得到广泛应用。

3．1 同工酶电泳法

同工酶是指来源相同，催化相同反应而结构不同的酶分子类型。同工酶谱差异主要是由决定酶蛋白本身的等位基因和非等位基因的差异造成的，同工酶谱是基因表达后的分子水平的表型，通过其谱带的分析能快速简便地识别出编码这些谱带的基因位点和等位基因。同工酶电泳法是从植物组织的蛋白粗提物中通过电泳技术和组织化学染色法来分离各种酶的同工酶，将酶的多种形式转变成肉眼可辨的酶谱带型。通过比较同工酶谱，来确定作物种子的纯度。目前，同工酶电泳法已被广泛用于建立遗传图谱、种群分析等相关研究中。与形态鉴定法相比，同工酶电泳法具备两个方面的优点：一是表现中性，对植物经济性状一般没有大的不良影响；二是直接反映了基因产物差异，受环境影响较小。目前，在作物种子纯度鉴定中，最常用的、多态性较强的是酯酶同工酶、过氧化物同工酶、磷酸酶同工酶等，所用电泳方法多为聚丙烯酰胺凝胶电泳法。

3．2种子蛋白电泳法

不同品种由于其遗传组成不同，其种子的蛋白质种类、数量、大小及结构等也不相同，通过电泳形成不同的蛋白质谱带，从而鉴别品种的真伪和纯度。种子中所含的蛋白质可分为清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白等，在品种鉴定上多是根据醇溶蛋白(禾谷类)和球蛋白(豆类)的多样性，所用电泳技术包括聚丙烯酰胺凝胶电泳、淀粉胶电泳及等电聚焦电泳等。但种子蛋白电泳对于某些遗传组成非常接近的品种不易找到特异蛋白，采用蛋白质电泳也难以发现用于区分的特征带。另外，蛋白质电泳图谱易受种子(或幼苗)发育阶段及表达器官的影响，有时不够稳定，影响了图谱分析，从而影响了鉴定结果的准确性。