蛋白质测定仪测定粗蛋白质的应用

来源： http://m.polyscience.com.cn/ 　类别：技术文章　更新时间：2014-08-08　阅读次

　　凯氏定氮法是目前国家测定粮食、油料、饲料等粗蛋白质含量的标准方法。是先测定出样品中的含氮量，再乘以蛋白子换算系数。在测定过程中需用已知含氮量的标准物质做对照试验经常用无水硫酸按，其含氮量为21.19%，但由于系统误差的存在，测定值与实际含氮量之间总是要存在一些误差。通过多年的试验对比，计算氮的回收率，再将其与蛋白质的测定.计算结合起来，能有效地解决这一问题。蛋白质测定仪也是对蛋白质含量进行测定的主要仪器，能够十分准确。
　　
　　首先，按国家标准的规定，称取0.2g硫酸按唯确至O.OOOlg)按照粗蛋白质的测定步骤作对照试验，按下式计算含氮量:N%)=c菠、一:}x14x共x100.········…...}1}式中:N—实测含氮量，%;vi—滴定样液时消耗盐酸溶液体积，ml;:。—空白试验消耗盐酸溶液的体积，ml;—盐酸溶液的浓度，mol/1;—硫酸按溶解后定容的体积，ml:‘—蒸馏时吸取硫酸按溶液的体积，ml;、—硫酸按的质量，mgo然后，按下式计算回收率:R%=21.19x100%，将2)式变形为:NR%=21.19，从3)式可以得出:1i)将测定值用回收率加以校正，即可得到实际值。基于此观点，将4>式两边同时除以R%，有:NR%(一，x14xv,xv半R%=21.19，4)式中:�！甓ǖ难嗡崛芤旱呐ǘ�;R%—待测定的回收率。
　　
　　在整个蛋白质测定仪试验过程中，若使用同一套凯氏定氮装置，保持同一操作条件，使用同一批次配制的盐酸溶液，则可以认为二“%保持不变，因“匕可以把cR%看作一个常数k,此时，4)式可化为:k(v}一。)x14xv,xv半=21.19式中:v,Iv}IvIv'1、在试验中均为已知或可知值，因此，只需求出k值即可。在将k代入粗蛋白质计算公式，这样，粗蛋白质的计算公式为:粗蛋白质汗基，%)=k(v}-vo)x14xPx于x10000，w(100-M)式中—实验用去的盐酸溶液体积，ml;—空白试验用去的盐酸溶液体积，ml;:—试样消化后定容的体积，ml:‘—蒸馏时取用稀释的消化液的体积，mlP—蛋白质换算系数;—试样重量，mg;M—试样水分百分率，%。
　　
　　通过蛋白质测定仪测定的结果论证，可以总结出:将回收率与蛋白质的测定结合在一起，能最大限度地减免系统误差，同时，盐酸溶液的浓度也不需标定，因此，整个测定过程更简捷更准确。